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想保護好徠卡顯微鏡,除了做包裹還需做機械維護

更新時間:2020-04-07 點擊量:2272
  徠卡顯微鏡包裹的目的是為了防止超薄切片在制備過程中被破壞。這一步對于顯微鏡分散的細胞樣品尤其必要。
 
  顯微鏡用于包裹的物質(zhì)有明膠,白蛋白,甲基纖維素、蔗糖等。
 
  下面以白蛋白為例,說明其具體方法:
 
  1、在一聚乙烯塑料管中加入牛血清白蛋白(BSA),BSA溶于0. lmol/L的磷酸緩沖液中,pH7,濃度為10%^-20%。
 
  2、將經(jīng)固定的組織塊表面的殘余液體用濾紙吸干,并迅速投入BSA中。
 
  3、顯微鏡一面振動塑料管,一面向其中逐滴加入25%的戊二醛,使管中戊二醛的終濃度為2.5%。
 
  4、在上述條件下,BSA約在半分鐘左右即可被戊二醛交連(聚合),顯微鏡用保險刀片將塑料管壁切除。把聚合的BSA切成小方塊,使其大小略大于包埋于其中的組織塊。
 
  如果樣品是游離細胞,可按下述步驟包裹:
 
  1、將BSA加入一離心管內(nèi),顯微鏡濃度與上同;
 
  2、把經(jīng)過固定的細胞轉(zhuǎn)入離心管;
 
  3、在冷凍離心機上離心10分鐘,800g, 40C;
 
  4、去掉上清,數(shù)碼顯微鏡在管底沉淀上加一滴用0. lmol/L磷酸緩沖液配制的10%的戊二醛,使殘余的BSA交連;
 
  5、用針把聚合后的團塊撥起,切成小塊。
 

  為防止顯微鏡冷凍時生成大的冰晶而使結(jié)構(gòu)破壞,組織需經(jīng)冷凍保護劑處理,常用的冷凍保護劑有甘油(30%),DMSO (20%)和蔗糖(2.3mol/L),均用緩沖液配制,顯微鏡組織在冷凍保護劑中浸泡的時間為0.5-1小時(室溫)或過液((400)
 
  為防止大的冰晶產(chǎn)生,數(shù)碼顯微鏡除使用冷凍保護劑外,應(yīng)采取速凍的辦法,其基本要求與具體作法和冷凍斷裂與蝕刻時相同,即將經(jīng)數(shù)碼顯微鏡冷凍保護的組織塊投入用液氮冷卻的氛里昂12內(nèi)。
 
  徠卡顯微鏡機械維護:
 
  使用防塵罩是保證顯微鏡處于良好機械和物理狀態(tài)的重要的因素。外殼如有污跡,能用乙醇或肥皂水來清潔(無用其他有機溶劑來清潔),但切勿讓這些清洗液滲入內(nèi)部,造成內(nèi)部電子部件的短路或燒毀。
 
  保持使用場地的干燥,盡管每臺徠卡顯微鏡均采用了特殊的防霉處理工藝,但當(dāng)它長期工作在濕度較大的環(huán)境中的話,還是容易增加霉變的幾率,因此如顯微鏡不得不工作在這些濕度較大的環(huán)境中,建議使用去濕機。
 
  另外,如發(fā)現(xiàn)光學(xué)元件表面有霧狀,霉斑等不良情況時,請立刻聯(lián)系徠卡專業(yè)人士,對您的儀器進行專業(yè)維護保養(yǎng)。
 
  建議
 
  采取下列措施,或許能更好的延長您的顯微鏡使用時間并使之保持良好的工作狀態(tài)。
 
  (1)每次關(guān)閉電源前,請將燈光調(diào)至暗。
 
  (2)關(guān)閉電源后,請等燈箱*冷卻后(約15分鐘后),在罩上防塵罩。
 
  (3)開啟電源后,若暫時不使用,可以將燈光調(diào)至暗,而無需頻繁開關(guān)電源。
 
  顯微鏡工作一年后,應(yīng)該每年至少做一次的專業(yè)維護保養(yǎng)。
 

京公網(wǎng)安備 11010802031222號

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